Gilberto Agustoni, né le 26 juillet 1922, à Schaffhouse en Suisse, est un cardinal de la Curie romaine, préfet émérite du Tribunal suprême de la Signature apostolique depuis 1998.

Après avoir suivi ses études de philosophie à l'université pontificale Saint-Thomas-d'Aquin à Rome, puis ses études de théologie à l'université de Fribourg, il a été ordonné prêtre le 20 avril 1946 pour le diocèse de Bâle en Suisse.

Il est alors devenu aumônier de mouvements d'action catholique, tout particulièrement auprès des jeunes et des étudiants.

En 1950, il est appelé par le cardinal Alfredo Ottaviani à la Curie romaine pour servir au sein de la Congrégation du Saint-Office tout en poursuivant des études en droit canon à l'université pontificale du Latran.

En 1970, il devient auditeur au tribunal de la Rote romaine.

Nommé secrétaire de la Congrégation pour le clergé le 18 décembre 1986, il est consacré le 6 janvier 1987 par le pape Jean-Paul II en personne. Il est ensuite nommé pro-préfet le 2 avril 1992, puis préfet le 26 novembre 1994 du Tribunal suprême de la Signature apostolique. Il s'est retiré de cette charge le 5 octobre 1998.

Il est créé cardinal par le pape Jean-Paul II lors du consistoire du 26 novembre 1994 avec le titre de cardinal-diacre de Ss. Urbano e Lorenzo a Prima Porta.

Il perd sa qualité d'électeur le jour de ses 80 ans le 26 juillet 2002, ce qui l'empêche de participer aux votes des conclaves de 2005 (élection de Benoît XVI) et de 2013 (élection de François).

Il a été élevé à la dignité de cardinal-prêtre le 24 février 2005.